13 Φεβρουαρίου 2022 | Mike Stone - ViroLiegy | Διαβάστε το εδώ
"Ο HIV δεν είναι ούτε αναγκαίος ούτε επαρκής για να προκαλέσει AIDS". -Luc Montagnier
VI Διεθνές Συνέδριο για το AIDS, 24 Ιουνίου 1990
http://aras.ab.ca/aidsquotes.htm
Αν παρακολουθείτε τις ειδήσεις πρόσφατα, ίσως έχετε ακούσει ότι αυτή τη στιγμή κυκλοφορεί στην Ολλανδία ένα νέο "εξαιρετικά ιογενές στέλεχος" του HIV (νομίζω ότι κάπου υπάρχει ένα λογοπαίγνιο). Μπορεί επίσης να έχετε ακούσει ότι υπάρχει ένα ολοκαίνουργιο πειραματικό εμβόλιο mRNA του HIV που έχει δείξει υποσχέσεις σε ζώα. Αν έχετε δώσει πραγματικά προσοχή, μπορεί να έχετε ακούσει ακόμη και για τον Γάλλο ιολόγο Luc Montagnier, τον άνθρωπο που πιστώνεται με την ανακάλυψη του HIV, και τις διάφορες επικριτικές δηλώσεις του κατά της επικίνδυνης χρήσης εμβολίων mRNA για το "Covid-19". Αν ναι, πιθανότατα γνωρίζετε επίσης ότι κατά τη διάρκεια αυτής της αυξημένης προσοχής που προσανατολίζεται προς τον HIV και τα εμβόλια mRNA, ο Luc Montagnier πέθανε πολύ πρόσφατα, στις 8 Φεβρουαρίου 2022. Ενώ έζησε μέχρι την ώριμη ηλικία των 89 ετών, πολλοί είναι καχύποπτοι για τη χρονική στιγμή του θανάτου του υπό το πρίσμα της τρέχουσας αναζωπύρωσης του HIV.
Αν και βρίσκω τη χρονική συγκυρία όλων αυτών των γεγονότων ενδιαφέρουσα, αυτό δεν είναι το αντικείμενο αυτού του άρθρου. Πάντα σχεδίαζα να ασχοληθώ με το αρχικό έγγραφο του Montagnier για τον HIV, αλλά δεν το έκανα, καθώς η απάτη με τον HIV/AIDS έχει αποκαλυφθεί λαμπρά από πολλούς άλλους πριν από μένα. Ωστόσο, πάντα ένιωθα ότι η απάτη του HIV είναι η τέλεια πύλη για την κατανόηση της απάτης του "Covid-19", καθώς οι πολυάριθμοι παραλληλισμοί με αυτό που συμβαίνει σήμερα είναι ανατριχιαστικοί. Μπορούμε να δούμε την ίδια κατάχρηση της PCR και των εξετάσεων αντισωμάτων, την ίδια επαναχρησιμοποίηση τοξικών φαρμακευτικών προϊόντων, την ίδια συλλογή διαφόρων συμπτωμάτων κάτω από μια γιγαντιαία ασθένεια-ομπρέλα, την ίδια προπαγάνδα που σπέρνει το φόβο των μολυσμένων, και τον ίδιο Anthony Fauci να ηγείται της όλης υπόθεσης. Παρόλο που δεν είναι στις προθέσεις μου να θίξω όλες αυτές τις πτυχές σε ένα άρθρο, το καλύτερο σημείο για να ξεκινήσουμε να ξετυλίγουμε αυτό το δαιδαλώδες πλέγμα εξαπάτησης ξεκινά από τον άνθρωπο που πιστώνεται την απελευθέρωση του τέρατος του HIV στον κόσμο, τον Luc Montagnier.
Ω, κύριε Montagnier, τι μεγάλο κεφάλι έχετε...!
Το 1983, στον Montagnier στάλθηκε δείγμα λεμφαδένων από έναν 33χρονο (προσέξτε την ηλικία) άνδρα που είχε διαπιστωμένα τα συμπτώματα του AIDS. Από αυτό το δείγμα, ο Montagnier και η ομάδα του ανακάλυψαν αυτό που ισχυρίζονταν ότι ήταν ένας νέος "ρετροϊός", αρχικά γνωστός ως L.A.V., για τον "ιό" που σχετίζεται με τη λεμφαδενοπάθεια. Μετά από διάφορα έμμεσα πειράματα, η ομάδα κατέληξε στο συμπέρασμα ότι χρειάζονταν περαιτέρω μελέτες προκειμένου να διαπιστωθεί αν ο νέος "ιός" είχε ή όχι κάποιο ρόλο στην αιτιολογία του AIDS. Μετά από αυτή την αρχική ανακάλυψη της πιθανής "ιογενούς" αιτίας του AIDS, υπήρξε ένα μικρό δράμα το 1984, όταν ο Αμερικανός ιολόγος Robert Gallo ισχυρίστηκε ότι αποκάλυψε ο ίδιος την αιτία του AIDS με την ανακάλυψη του HTLV-3. Για να μην τα πολυλογώ, αργότερα διαπιστώθηκε ότι ο Gallo είχε χρησιμοποιήσει/δανειστεί/κλέψει ένα δείγμα από τον ίδιο ασθενή με τον Montagnier και είχε αποκαλύψει τον ίδιο "ιό". Ο "ιός" μετονομάστηκε τελικά σε HIV το 1986 και το 2008, ο Luc Montagnier τιμήθηκε με το βραβείο Νόμπελ για την ανακάλυψή του, ενώ ο Robert Gallo μουτρωμένος κάπου σε μια σκοτεινή γωνιά.
Μια από τις ωραιότερες πτυχές του να γράφει κανείς για την αρχική εργασία του Montagnier για τον HIV τώρα, το 2022, είναι ότι εκ των υστέρων, ο ίδιος ο Montagnier διέλυσε τα δικά του στοιχεία για την ύπαρξη του "ρετροϊού" του κατά τις δεκαετίες που ακολούθησαν τη δημοσίευση της εργασίας του το 1983. Ένα τέλειο παράδειγμα αυτού βρίσκεται σε μια συνέντευξη που έδωσε ο Montagnier το 1997 στον επιστημονικό δημοσιογράφο Djamel Tahi. Έχω παραθέσει στιγμιότυπα από αυτή τη συνέντευξη παρακάτω, ωστόσο συνιστώ οπωσδήποτε να διαβάσετε κάποια στιγμή ολόκληρη τη συζήτηση. Κατά την ανάγνωση, σημειώστε τις υποθέσεις που έκανε ο Montagnier σχετικά με τον "ιό" του, τις διάφορες αντιφάσεις στις δηλώσεις του και τις αποκαλύψεις σχετικά με τη σχέση (ή την έλλειψη αυτής) του HIV με το AIDS. Αυτή η συνέντευξη παρέχει μια εις βάθος ματιά στο παράλογο σκεπτικό ενός ιολόγου που έχει κολλήσει σε αναπόδεικτες θεωρίες και ψευδοεπιστημονικά δόγματα:
Συνέντευξη με τον καθηγητή Luc Montagnier από τον Djamel TAHI - (Ινστιτούτο Παστέρ, Ιούλιος 1997)
Djamel TAHI: Μια ομάδα επιστημόνων από την Αυστραλία υποστηρίζει ότι κανείς μέχρι σήμερα δεν έχει απομονώσει τον ιό του AIDS, τον HIV. Γι' αυτούς οι κανόνες απομόνωσης των ρετροϊών δεν έχουν τηρηθεί προσεκτικά για τον HIV. Αυτοί οι κανόνες είναι: καλλιέργεια, καθαρισμός του υλικού με υπερφυγοκέντρηση, φωτογραφίες με ηλεκτρονικό μικροσκόπιο (ΗΜ) του υλικού που έχει ζώνες με την πυκνότητα του ρετροϊού, χαρακτηρισμός των σωματιδίων αυτών, απόδειξη της μολυσματικότητας των σωματιδίων.
Luc Montagnier: Όχι, αυτό δεν είναι απομόνωση. Κάναμε απομόνωση επειδή "περάσαμε" τον ιό, κάναμε καλλιέργεια του ιού. Για παράδειγμα, ο Gallo είπε: "Ο Γκάλο είπε ότι ο ιός δεν είναι ο μόνος που μπορεί να προκαλέσει την ασθένεια: "Δεν έχουν απομονώσει τον ιό... και εμείς (Gallo et al.), τον κάναμε να εμφανιστεί σε αφθονία σε μια αθάνατη κυτταρική σειρά". Αλλά πριν τον κάνουμε να εμφανιστεί σε αθάνατες κυτταρικές σειρές, τον κάναμε να εμφανιστεί σε καλλιέργειες φυσιολογικών ιμφοκυττάρων από αιμοδότη. Αυτό είναι το βασικό κριτήριο. Είχαμε κάτι που μπορούσαμε να μεταδώσουμε κατά σειρά, που μπορούσαμε να διατηρήσουμε. Και να χαρακτηρίζεται ως ρετροϊός όχι μόνο από τις οπτικές του ιδιότητες, αλλά και από τη βιοχημεία, τη δραστηριότητα RT [αντίστροφη μεταγραφάση], η οποία είναι πραγματικά ειδική για τους ρετροϊούς. Είχαμε επίσης τις αντιδράσεις των αντισωμάτων έναντι ορισμένων πρωτεϊνών, πιθανώς των εσωτερικών πρωτεϊνών. Λέω πιθανώς κατ' αναλογία με τη γνώση άλλων ρετροϊών. Δεν θα μπορούσε κανείς να απομονώσει αυτόν τον ρετροϊό χωρίς τη γνώση άλλων ρετροϊών, αυτό είναι προφανές. Πιστεύω όμως ότι έχουμε απαντήσει στα κριτήρια της απομόνωσης. Εντελώς.
Djamel TAHI: σύμφωνα με διάφορες δημοσιευμένες αναφορές που επικαλείται η αυστραλιανή ομάδα, η RT δεν είναι ειδική για τους ρετροϊούς και επιπλέον η εργασία σας για την ανίχνευση της RT δεν έγινε στο καθαρισμένο υλικό;
Luc Montagnier:Νομίζω ότι δημοσιεύσαμε στο Science (Μάιος 1983) μια κλίση που έδειξε ότι η RT είχε ακριβώς την πυκνότητα 1,16. Έτσι, είχαμε μια "κορυφή" που ήταν η RT. Έτσι, πληρούσε κανείς αυτό το κριτήριο για τον καθαρισμό. Αλλά το να το περάσεις σειριακά είναι δύσκολο, διότι όταν βάζεις το υλικό στον καθαρισμό, σε μια βαθμίδα, οι ρετροϊοί είναι πολύ εύθραυστοι, οπότε σπάνε ο ένας τον άλλον και χάνουν πολύ τη μολυσματικότητά τους. Αλλά νομίζω ότι ακόμη και έτσι καταφέραμε να διατηρήσουμε ένα μικρό μέρος της μολυσματικότητάς τους. Αλλά δεν ήταν τόσο εύκολο όσο το κάνει κανείς σήμερα, επειδή οι ποσότητες του ιού ήταν παρ' όλα αυτά πολύ αδύναμες. Στην αρχή πέσαμε πάνω σε έναν ιό που δεν σκότωνε τα κύτταρα. Ο ιός προερχόταν από έναν ασυμπτωματικό ασθενή και έτσι κατατάχθηκε μεταξύ των μη συγγενικών, μη κυτταροπαθογόνων ιώνχρησιμοποιώντας τον συνυποδοχέα ccr5. Ήταν ο πρώτος ιός BRU. Κάποιος είχε πολύ λίγο από αυτόν και δεν μπορούσε να τον μεταδώσει σε μια αθάνατη κυτταρική σειρά. Προσπαθήσαμε για μερικούς μήνες, αλλά δεν τα καταφέραμε. Το πετύχαμε πολύ εύκολα με το δεύτερο στέλεχος. Όμως υπάρχει το αρκετά μυστηριώδες πρόβλημα της μόλυνσης αυτού του δεύτερου στελέχους από το πρώτο. Αυτό ήταν το LAI.
Djamel TAHI: Γιατί οι φωτογραφίες ΕΜ που δημοσιεύετε, προέρχονται από την καλλιέργεια και όχι από τον καθαρισμό;
Luc Montagnier: Ήταν τόσο μικρή η παραγωγή του ιού που ήταν αδύνατο να δούμε τι θα μπορούσε να υπάρχει σε ένα συμπύκνωμα ιού στην κλίση. Δεν υπήρχε αρκετός ιός για να γίνει αυτό. Φυσικά, τον έψαχνε κανείς, τον έψαχνε στους ιστούς στην αρχή, ομοίως και στις βιοψίες. Είδαμε κάποια σωματίδια, αλλά δεν είχαν τη μορφολογία που χαρακτηρίζει τους ρετροϊούς. Ήταν πολύ διαφορετικά. Σχετικά διαφορετικοί. Έτσι με την καλλιέργεια χρειάστηκαν πολλές ώρες για να βρούμε τις πρώτες εικόνες. Ήταν μια ρωμαϊκή προσπάθεια! Είναι εύκολο να κριτικάρεις μετά το γεγονός. Αυτό που δεν είχαμε, και πάντα το αναγνώριζα, ήταν ποιά ήταν πραγματικά η αιτία του AIDS.
Djamel TAHI:Πώς είναι δυνατόν, χωρίς εικόνες ΕΜ από τον καθαρισμό, να γνωρίζουμε εάν τα σωματίδια αυτά είναι ιϊκά και ανήκουν σε έναν ρετροϊό, και μάλιστα σε έναν συγκεκριμένο ρετροϊό;
Luc Montagnier: Λοιπόν, υπήρχαν οι εικόνες της εκβλάστησης. Δημοσιεύσαμε εικόνες εκβλάστησης οι οποίες είναι χαρακτηριστικές των ρετροϊών. Τούτου λεχθέντος, με βάση τη μορφολογία και μόνο δεν θα μπορούσε κανείς να πει ότι πρόκειται πραγματικά για ρετροϊό. Για παράδειγμα, ένας Γάλλος ειδικός στα ΗΜ των ρετροϊών μου επιτέθηκε δημοσίως λέγοντάς μου: "Αυτός δεν είναι ρετροϊός, είναι αρενοϊός". Διότι υπάρχουν και άλλες οικογένειες ιών που εκκολάπτονται και έχουν αιχμές στην επιφάνεια κ.λπ.
Djamel TAHI:Γιατί αυτή η σύγχυση; Οι εικόνες ΗΜ δεν έδειχναν ξεκάθαρα έναν ρετροϊό;
Luc Montagnier:Εκείνη την περίοδο οι πιο γνωστοί ρετροϊοί ήταν εκείνοι του τύπου C, οι οποίοι ήταν πολύ τυπικοί. Αυτός ο ρετροϊός δεν ήταν τύπου C και οι λεντιϊοί ήταν ελάχιστα γνωστοί. Εγώ ο ίδιος τον αναγνώρισα κοιτάζοντας στη βιβλιοθήκη εικόνες του ιού της λοιμώδους αναιμίας των ιπποειδών και αργότερα του ιού της visna. Αλλά επαναλαμβάνω, δεν ήταν μόνο η μορφολογία και η εκβλάστηση, υπήρχε RT (retrovirus)... ήταν το σύνολο αυτών των ιδιοτήτων που με έκανε να πω ότι επρόκειτο για ρετροϊό.
Djamel TAHI: Σχετικά με τoν RT, ανιχνεύεται στην καλλιέργεια. Στη συνέχεια, γίνεται καθαρισμός όπου βρίσκει κανείς ρετροϊικά σωματίδια. Αλλά σε αυτή την πυκνότητα υπάρχουν και πολλά άλλα στοιχεία, μεταξύ άλλων αυτά που ονομάζουμε "ιόμορφα".
Luc Montagnier: Ακριβώς, ακριβώς. Αν θέλετε, δεν είναι μια ιδιότητα αλλά το σύνολο των ιδιοτήτων που μας έκανε να πούμε ότι πρόκειται για ρετροϊό της οικογένειας των λεντιβιρών. Μεμονωμένες, κάθε μία από τις ιδιότητες δεν είναι πραγματικά συγκεκριμένες. Είναι το σύνολο τους. Έτσι είχαμε: την πυκνότητα, την RT, τις εικόνες της εκβλάστησης και την αναλογία με τον ιό visna. Αυτά είναι τα τέσσερα χαρακτηριστικά.
Djamel TAHI: Αλλά πώς όλα αυτά τα στοιχεία επιτρέπουν την απόδειξη ότι πρόκειται για έναν νέο ρετροϊό; Κάποια από αυτά τα στοιχεία θα μπορούσαν να ανήκουν σε άλλα πράγματα, "σαν ιούς"...;
Luc Montagnier: Ναι, και επιπλέον έχουμε ενδογενείς ρετροϊούς που μερικές φορές εκφράζουν σωματίδια - αλλά ενδογενούς προέλευσης, και οι οποίοι επομένως δεν έχουν παθολογικό ρόλο, σε κάθε περίπτωση όχι στο AIDS.
Djamel TAHI: Αλλά τότε πώς μπορεί κανείς να καταλάβει τη διαφορά;
Luc Montagnier: Επειδή θα μπορούσαμε να "μεταδώσουμε" τον ιό. Μεταδώσαμε τη δραστηριότητα RT σε νέα ιμφοκύτταρα. Είχαμε μια "αιχμή" αντιγραφής. Παρακολουθούσαμε τον ιό. Είναι η συγκέντρωση των ιδιοτήτων που μας έκανε να πούμε ότι πρόκειται για ρετροϊό. Και γιατί νέος; Το πρώτο ερώτημα που μας έθεσε η Φύση ήταν: "Δεν πρόκειται για εργαστηριακή μόλυνση; Μήπως είναι μήπως ένας ρετροϊός ποντικού ή ένας ζωικός ρετροϊός;". Σε αυτό θα μπορούσαμε να πούμε όχι! Διότι είχαμε δείξει ότι ο ασθενής είχε αντισώματα έναντι μιας πρωτεΐνης του δικού του ιού. Η συναρμογή έχει μια τέλεια λογική! Αλλά είναι σημαντικό να το λάβουμε ως συναρμογή. Αν πάρετε κάθε ιδιότητα ξεχωριστά, δεν είναι συγκεκριμένη. Είναι το σύνολο που δίνει την ιδιαιτερότητα.
Djamel TAHI: Με τι καλλιεργήσατε τα λεμφοκύτταρα του ασθενούς σας; Με την κυτταρική σειρά H9;
Luc Montagnier: Όχι, διότι δεν λειτούργησε καθόλου με την H9. Χρησιμοποιήσαμε πολλές κυτταρικές σειρές και η μόνη που μπορούσε να το παράγει ήταν τα λεμφοκύτταρα Tampon (!;).
Djamel TAHI: Όταν κάποιος κοιτάζει τις δημοσιευμένες φωτογραφίες στο ηλεκτρονικό μικροσκόπιο, για εσάς ως ρετροβιολόγο είναι σαφές ότι πρόκειται για έναν ρετροϊό, έναν νέο ρετροϊό;
Luc Montagnier: Όχι, σε αυτό το σημείο δεν μπορεί κανείς να πει. Με τις πρώτες φωτογραφίες εκβλάστησης θα μπορούσε να είναι ένας ιός τύπου C. Δεν μπορεί κανείς να το διακρίνει.
Djamel TAHI: Θα μπορούσε να είναι κάτι άλλο εκτός από ρετροϊός;
Luc Montagnier: Όχι... καλά, τελικά, ναι... θα μπορούσε να είναι ένας άλλος εκκολαπτόμενος ιός. Αλλά έχουμε έναν άτλαντα. Κάποιος γνωρίζει λίγο από την εξοικείωση, τι είναι ρετροϊός και τι όχι. Με τη μορφολογία μπορεί κανείς να διακρίνει, αλλά χρειάζεται κάποια εξοικείωση.
Djamel TAHI: Γιατί δεν γίνεται καθαρισμός;
Luc Montagnier: Επαναλαμβάνω ότι δεν κάναμε καθαρισμό. Καθαρίσαμε για να χαρακτηρίσουμε την πυκνότητα της RT, η οποία ήταν σαφώς αυτή ενός ρετροϊού. Αλλά δεν πήραμε την "κορυφή"... ή δεν λειτούργησε... γιατί αν καθαρίσεις, κάνεις ζημιά. Οπότε για τα μολυσματικά σωματίδια είναι προτιμότερο να μην τα αγγίζεις πολύ. Παίρνεις λοιπόν απλά το υπερκείμενο από την καλλιέργεια λεμφοκυττάρων που έχουν παράγει τον ιό και το βάζεις σε μικρή ποσότητα σε κάποιες νέες καλλιέργειες λεμφοκυττάρων. Και έπεται συνέχεια, περνάτε τον ρετροϊό σειριακά και έχετε πάντα τα ίδια χαρακτηριστικά και αυξάνετε την παραγωγή κάθε φορά που τον περνάτε.
Djamel TAHI: Αλλά έρχεται ένα σημείο όπου πρέπει να γίνει ο χαρακτηρισμός του ιού. Αυτό σημαίνει: ποιες είναι οι πρωτεΐνες από τις οποίες αποτελείται;
Luc Montagnier: Αυτό είναι. Έτσι λοιπόν, η ανάλυση των πρωτεϊνών του ιού απαιτεί μαζική παραγωγή και καθαρισμό. Είναι απαραίτητο να γίνει αυτό. Και εδώ θα πρέπει να πω ότι αυτό απέτυχε εν μέρει. Ο J.C. Chermann ήταν υπεύθυνος γι' αυτό, τουλάχιστον για τις εσωτερικές πρωτεΐνες. Και είχε δυσκολίες στην παραγωγή του ιού και δεν λειτούργησε. Αλλά αυτός ήταν ένας πιθανός τρόπος, ο άλλος τρόπος ήταν να έχουμε το νουκλεϊκό οξύ, κλωνοποίηση κ.λπ. Είναι αυτός ο τρόπος που λειτούργησε πολύ γρήγορα. Ο άλλος τρόπος δεν λειτούργησε επειδή είχαμε εκείνη την εποχή ένα σύστημα παραγωγής που δεν ήταν αρκετά ισχυρό. Δεν είχαμε αρκετά σωματίδια που παρήχθησαν για να καθαρίσουμε και να χαρακτηρίσουμε τις ιικές πρωτεΐνες. Αυτό δεν μπορούσε να γίνει. Εκείνη την εποχή δεν μπορούσε να παραχθεί μεγάλη ποσότητα ιού επειδή ο ιός αυτός δεν εμφανιζόταν στην αθάνατη κυτταρική σειρά. Θα μπορούσαμε να το κάνουμε με τον ιό LAI, αλλά εκείνη την εποχή δεν το γνωρίζαμε αυτό.
Djamel TAHI: Ο Gallo τον έκανε;
Luc Montagnier:Ο Gallo; Gallo;... δεν ξέρω αν πραγματικά τον καθάρισε. Δεν το πιστεύω. Πιστεύω ότι ξεκίνησε πολύ γρήγορα το μοριακό μέρος, δηλαδή την κλωνοποίηση. Αυτό που έκανε είναι η Western Blot (δυτική κηλίδα). Χρησιμοποιήσαμε την τεχνική RIPA, οπότε αυτό που έκανε και ήταν καινούργιο ήταν ότι έδειξε κάποιες πρωτεΐνες τις οποίες δεν είχε δει κανείς καλά με την άλλη τεχνική. Εδώ είναι μια άλλη πτυχή του χαρακτηρισμού του ιού. Δεν μπορείτε να τον καθαρίσετε, αλλά αν γνωρίζετε κάποιον που έχει αντισώματα έναντι των πρωτεϊνών του ιού, μπορείτε να καθαρίσετε το σύμπλοκο αντισώματος/αντιγόνου. Αυτό ακριβώς έκανε κάποιος. Και έτσι είχε κανείς μια ορατή ζώνη, ραδιενεργά σημασμένη, την οποία ονόμασε πρωτεΐνη 25, p25. Και ο Gallo είδε και άλλες. Υπήρχε η p25 την οποία ονόμασε p24, υπήρχε η p41 την οποία είδαμε...
Djamel TAHI: Σχετικά με τα αντισώματα, πολυάριθμες μελέτες έχουν δείξει ότι αυτά τα αντισώματα αντιδρούν με άλλες πρωτεΐνες ή στοιχεία που δεν αποτελούν μέρος του HIV. Και ότι δεν μπορούν να είναι επαρκή για τον χαρακτηρισμό των πρωτεϊνών του HIV.
Luc Montagnier: Όχι! Επειδή είχαμε ελέγχους. Είχαμε ανθρώπους που δεν είχαν AIDS και δεν είχαν αντισώματα έναντι αυτών των πρωτεϊνών. Και οι τεχνικές που χρησιμοποιήσαμε ήταν τεχνικές που είχα τελειοποιήσει ο ίδιος μερικά χρόνια πριν, για να ανιχνεύσω το γονίδιο src. Βλέπετε, το γονίδιο src ανιχνεύθηκε επίσης με ανοσοκατακρήμνιση. Ήταν η p60 [πρωτεΐνη 60]. Ήμουν πολύ επιδέξιος, και ο τεχνικός μου επίσης, με την τεχνική RIPA. Αν κάποιος έχει μια ειδική αντίδραση, είναι ειδική.
Djamel TAHI: Γνωρίζουμε όμως ότι οι ασθενείς με AIDS έχουν μολυνθεί με πλήθος άλλων μολυσματικών παραγόντων που είναι επιρρεπείς στην πρόκληση διασταυρούμενων αντιδράσεων.
Luc Montagnier: Ναι, αλλά τα αντισώματα είναι πολύ συγκεκριμένα. Ξέρουν να διακρίνουν ένα μόριο σε ένα εκατομμύριο. Υπάρχει μια πολύ μεγάλη συγγένεια. Όταν τα αντισώματα έχουν επαρκή συγγένεια, ψαρεύετε κάτι πραγματικά πολύ συγκεκριμένο. Με τα μονοκλωνικά αντισώματα ψαρεύετε πραγματικά ΜΙΑ πρωτεΐνη. Όλα αυτά χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση διαγνωστικών αντιγόνων.
Djamel TAHI: Για εσάς η p41 δεν ήταν ιϊκής προέλευσης και άρα δεν ανήκε στον HIV. Για τον Gallo ήταν η πιο ειδική πρωτεΐνη του HIV. Γιατί αυτή η αντίφαση;
Luc Montagnier: Και οι δύο είχαμε δίκιο. Αυτό σημαίνει ότι εγώ στην τεχνική μου RIPA... στην πραγματικότητα υπάρχουν κυτταρικές πρωτεΐνες που συναντά κανείς παντού - υπάρχει ένας μη ειδικός "θόρυβος υποβάθρου", και μεταξύ αυτών των πρωτεϊνών μία είναι πολύ άφθονη στα κύτταρα, η οποία είναι η ακτίνη. Και αυτή η πρωτεΐνη έχει μοριακό βάρος 43000kd. Επομένως, ήταν εκεί. Είχα λοιπόν λογικά δίκιο, αλλά αυτό που είδε ο Gallo από την άλλη πλευρά ήταν η gp41 του HIV, επειδή χρησιμοποιούσε το Western Blot. Και αυτό το αναγνώρισα.
Djamel TAHI: Για εσάς η p24 ήταν η πιο ειδική πρωτεΐνη του HIV, για τον Gallo καθόλου. Αναγνωρίζει κανείς χάρη σε άλλες μελέτες ότι αντισώματα που στρέφονται κατά της p24 βρέθηκαν συχνά σε ασθενείς που δεν είχαν μολυνθεί από τον HIV, ακόμη και σε ορισμένα ζώα. Στην πραγματικότητα, σήμερα, η αντίδραση αντισωμάτων με την p24 θεωρείται μη ειδική.
Luc Montagnier: Δεν αρκεί για τη διάγνωση της λοίμωξης από τον HIV.
Djamel TAHI: Καμία πρωτεΐνη δεν είναι επαρκής.
Luc Montagnier: Καμία πρωτεΐνη δεν είναι επαρκής ούτως ή άλλως. Αλλά εκείνη την εποχή το πρόβλημα δεν αποκαλύφθηκε έτσι. Το πρόβλημα ήταν να γνωρίζουμε αν επρόκειτο για HTLV ή όχι. Ο μόνος γνωστός ανθρώπινος ρετροϊός ήταν ο HTLV. Και δείξαμε ξεκάθαρα ότι δεν ήταν HTLV, ότι τα μονοκλωνικά αντισώματα του Gallo έναντι του p24 του HTLV δεν αναγνώριζαν το p25 του HIV.
Djamel TAHI: Στην πυκνότητα των ρετροϊών, 1,16, υπάρχουν πολλά σωματίδια, αλλά μόνο το 20% από αυτά ανήκουν στον HIV. Γιατί το 80% των πρωτεϊνών δεν είναι ιογενείς και οι υπόλοιπες είναι; Πώς μπορεί κανείς να καταλάβει τη διαφορά;
Luc Montagnier: Υπάρχουν δύο εξηγήσεις. Για το ένα μέρος, σε αυτή την πυκνότητα έχουμε αυτό που ονομάζουμε μικροκυψελίδες κυτταρικής προέλευσης, οι οποίες έχουν περίπου το ίδιο μέγεθος με τον ιό, και στη συνέχεια ο ίδιος ο ιός, κατά την εκκόλαψη, φέρνει κυτταρικές πρωτεΐνες. Οπότε ουσιαστικά αυτές οι πρωτεΐνες δεν είναι ιικές, είναι κυτταρικής προέλευσης. Οπότε, πώς να καταλάβουμε τη διαφορά; Ειλικρινά, με αυτή την τεχνική δεν μπορεί κανείς να το κάνει με ακρίβεια. Αυτό που μπορούμε να κάνουμε είναι να καθαρίσουμε τον ιό στο μέγιστο με διαδοχικές κλίσεις, και πάντα σκοντάφτουμε στις ίδιες πρωτεΐνες.
Djamel TAHI: Οι άλλες εξαφανίζονται;
Luc Montagnier: Ας πούμε ότι οι άλλοι μειώνονται λίγο. Βγάζετε τα μικροκυψελίδια, αλλά κάθε φορά χάνετε πολύ ιό, οπότε είναι απαραίτητο να έχετε πολύ ιό στην αρχή για να κρατήσετε λίγο όταν φτάσετε στο τέλος. Και στη συνέχεια, πάλι είναι η μοριακή ανάλυση, είναι η αλληλουχία αυτών των πρωτεϊνών που θα επιτρέψει να πει κανείς αν είναι ιικής προέλευσης ή όχι. Αυτό ξεκινήσαμε για την p25, που απέτυχε... και η άλλη τεχνική είναι να κάνουμε την κλωνοποίηση, και έτσι μετά έχουμε το DNA και από το DNA παίρνουμε τις πρωτεΐνες. Συμπεραίνεις την αλληλουχία των πρωτεϊνών και το μέγεθός τους και, σκοντάφτεις πάλι σε αυτό που έχεις ήδη παρατηρήσει με ανοσοκατακρήμνιση ή με ηλεκτροφόρηση σε πηκτή. Και ξέρει κανείς κατ' αναλογία με τα μεγέθη των πρωτεϊνών άλλων ρετροϊών, μπορεί να συμπεράνει αρκετά στενά αυτές τις πρωτεΐνες. Έτσι έχετε την p25 που ήταν κοντά στην p24 του HTLV, έχετε την p18.. στο τέλος έχετε και τις άλλες. Από την άλλη πλευρά αυτή που ήταν πολύ διαφορετική ήταν η πολύ μεγάλη πρωτεΐνη, η p120.
Η συνέντευξη του Luc Montagnier από το 1997 είναι μια συλλογή αποκαλύψεων. Μπορούμε να δούμε ξεκάθαρα, όπως επανέλαβε ο Montagnier σε περισσότερες από μία περιπτώσεις, ότι ο ίδιος (και ο Robert Gallo σύμφωνα με τις γνώσεις του) δεν καθάρισαν κανέναν "ιό". Γιατί αυτό είναι σημαντικό; Για να διαπιστωθεί αν υπάρχει πράγματι ένας "ιός", τα σωματίδια πρέπει να καθαριστούν (να απαλλαγούν από μολυσματικές ουσίες, ρύπους και ξένα στοιχεία), ώστε να μπορέσουν να απομονωθούν (να διαχωριστούν από οτιδήποτε άλλο). Μόνο όταν συμβεί αυτό, τα σωματίδια που θεωρούνται "ιός" μπορούν στη συνέχεια να αποδειχθούν παθογόνα μέσω πειραμάτων. Μόνο τα καθαρισμένα σωματίδια μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την οπτικοποίηση καθώς και για τον βιοχημικό και μοριακό χαρακτηρισμό του "ιού" προκειμένου να προσδιοριστούν συγκεκριμένες πρωτεΐνες, αντισώματα, γονιδιωματική αλληλουχία, απεικόνιση με ηλεκτρονικό μικροσκόπιο κ.λπ. Χωρίς καθαρισμό, δεν μπορεί κανείς να προσδιορίσει ότι ο "ιός" υπάρχει καθόλου και τα μη ειδικά εργαστηριακά αποτελέσματα που λαμβάνονται από μη καθαρισμένο υλικό είναι απολύτως ανούσια.
Όπως κάνουν οι περισσότεροι ιολόγοι, ο Montagnier ισχυρίστηκε ότι παρόλο που δεν καθάρισε τον "ιό" και επομένως δεν είχε άμεσες αποδείξεις για την ύπαρξή του, είχε πολλές μη ειδικές έμμεσες αποδείξεις που όταν προστέθηκαν μαζί, έγιναν "ειδικές" για τον "ιό". Η συσσώρευση των έμμεσων στοιχείων ήταν αυτή που απέδειξε την ύπαρξη του "ιού" του. Στην ουσία, είχε μια έμμεση υπόθεση βασισμένη σε στοιχεία που δεν προέκυπταν από άμεση παρατήρηση. Αυτό θα θεωρούνταν αδύναμη υπόθεση σε ένα δικαστήριο.
Εξετάζοντας την έμμεση υπόθεσή του, ο Montagnier παραδέχθηκε ότι χωρίς καθαρισμό, οι εικόνες των σωματιδίων που λαμβάνονται από το ηλεκτρονικό μικροσκόπιο δεν θα μπορούσαν να ισχυριστούν οριστικά ότι είναι "ρετροϊοί" ή "ιοί" οποιουδήποτε είδους με βάση τη μορφολογική εμφάνιση και μόνο. Δήλωσε ότι ήταν απαραίτητο να έχει κανείς πρώτα γνώση άλλων "ρετροϊών" προκειμένου να ανακαλύψει έναν νέο. Ο ίδιος αναφέρθηκε σε έναν άτλαντα με εικόνες άλλων "ρετροϊών" προκειμένου να ισχυριστεί ότι τα μη καθαρισμένα σωματίδια του ήταν επίσης "ρετροϊοί". Ωστόσο, αυτό που δεν παραδέχθηκε ο Montagnier είναι ότι αυτός ο άτλαντας των "ρετροϊών" αποτελούνταν επίσης από εικόνες μη καθαρισμένων σωματιδίων. Επομένως, κανένα από τα σωματίδια που απεικονίστηκαν στον άτλαντά του δεν θα μπορούσε να θεωρηθεί σωματίδιο "ρετροϊού" μέχρι να κυκλοφορήσουν στοιχεία για καθαρισμένους/απομονωμένους "ρετροϊούς". Ο καθαρισµός θα έπρεπε να έχει πραγµατοποιηθεί µε τον πρώτο "ρετροϊό" που ανακαλύφθηκε και απεικονίστηκε ποτέ για να είναι έγκυρη αυτή η µέθοδος αναγνώρισης. Ο Montagnier παραδέχτηκε ότι, ενώ ο καθαρισμός είναι ένα απαραίτητο βήμα, είναι αδύνατο, καθώς όσο περισσότερο καθαρίζεις το δείγμα, τόσο μεγαλύτερη ζημιά υφίστανται τα σωματίδια και τόσο λιγότερο "ιό" έχεις στο τέλος. Εφόσον δήλωσε ότι δεν καθάρισαν την καλλιέργεια που χρησιμοποιήθηκε για τη λήψη των ΗΜ εικόνων του "HIV", δεν υπάρχει καμία απόδειξη ότι τα τυχαία σωματίδια που ισχυρίζονται ότι είναι ο HIV είναι στην πραγματικότητα ένας "ιός", σε καμμία περίπτωη.
Ο Montagnier προσπάθησε επίσης να ισχυριστεί ότι τα αντισώματα/αντιγόνα, όπως η πρωτεΐνη p24, είναι ειδικά για τον HIV και ότι μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως μέρος της απόδειξης για την ύπαρξη του "ιού" του. Ωστόσο, όπως επισήμανε με εμπειρογνωμοσύνη ο Djamel, οι πρωτεΐνες αυτές δεν είναι ειδικές για τον HIV, καθώς υπάρχουν πάνω από 60 καταστάσεις (όπως η εγκυμοσύνη, η φυματίωση, το εμβόλιο της γρίπης κ.λπ.) με σχετικές πρωτεΐνες που μπορούν να προκαλέσουν θετικά τεστ για τον HIV. Ο Montagnier κατέληξε να παραδεχτεί ότι καμία πρωτεΐνη δεν είναι επαρκής για τη διάγνωση του HIV ακυρώνοντας έτσι τους όποιους ισχυρισμούς του σχετικά με την ειδικότητα των αντισωμάτων/αντιγόνων και την αξία τους να χρησιμοποιούνται ως έμμεσες αποδείξεις για την ύπαρξη ενός αόρατου "ιού".
Η μεγαλύτερη αποκάλυψη του Montagnier σε αυτή τη συνέντευξη του 1997 είναι η πεποίθησή του ότι ο HIV δεν είναι η αιτία του AIDS. Ενώ πίστευε ότι είχε ανακαλύψει έναν νέο "ρετροϊό" βασιζόμενος σε μια συσσώρευση αδύναμων έμμεσων αποδείξεων, σύμφωνα με τη δήλωσή του δεν ήταν παθογόνος. Αν πάρουμε τις έμμεσες αποδείξεις του και τις αναλύσουμε, ο Motagnier δεν είχε καθαρισμένα σωματίδια "ιού", πράγμα που σημαίνει ότι οι ΕΜ εικόνες του είναι άχρηστες, οι εξετάσεις αντισωμάτων του είναι ανούσιες και η γονιδιωματική αλληλουχία είναι άχρηστη. Χωρίς καθαρισμένα σωματίδια, δεν είχε καμία απόδειξη της παθογένειας, καθώς δεν είχε καμία έγκυρη ανεξάρτητη μεταβλητή προκειμένου να διαπιστώσει την αιτία και το αποτέλεσμα. Είναι εκπληκτικό το γεγονός ότι ο Montagnier πίστευε ότι είχε έναν "ιό", καθώς με κάθε ουσιαστικό δυνατό τρόπο, δεν είχε αποδείξεις για έναν τέτοιο ιό.
Με όλα αυτά να έχουν ειπωθεί, για όσους εξακολουθούν να ενδιαφέρονται να διαβάσουν την αρχική εργασία του Montagnier του 1983, η οποία δεν περιείχε καμία απόδειξη για οποιονδήποτε "ιό", εδώ είναι η εργασία στο σύνολό της:
Isolation of a T-Lymphotropic Retrovirus from a Patient at Risk for Acquired Immune Deficiency Syndrome (AIDS)
Περίληψη. Ένας ρετροϊός που ανήκει στην οικογένεια των πρόσφατα ανακαλυφθέντων ιών της ανθρώπινης Τ-κυτταρικής λευχαιμίας (HTLV), αλλά είναι σαφώς διακριτός από κάθε προηγούμενη απομόνωση, απομονώθηκε από έναν καυκάσιο ασθενή με σημεία και συμπτώματα που συχνά προηγούνται του συνδρόμου επίκτητης ανοσολογικής ανεπάρκειας (AIDS). Ο ιός αυτός είναι ένας τυπικός καρκινικός ιός RNA τύπου C, εκφύεται από την κυτταρική μεμβράνη, προτιμά το μαγνήσιο για τη δραστηριότητα της αντίστροφης μεταγραφάσης και έχει ένα εσωτερικό αντιγόνο (p25) παρόμοιο με το HTLVp24. Τα αντισώματα από τον ορό αυτού του ασθενούς αντιδρούν με πρωτεΐνες από ιούς της υποομάδας HTLV-I, αλλά οι ειδικοί για τον τύπο αντιοροί για τον HTLV-I δεν κατακρημνίζουν τις πρωτεΐνες του νέου απομονωμένου ιού. Ο ιός από αυτόν τον ασθενή έχει μεταδοθεί στα λεμφοκύτταρα του ομφαλοπλακουντιακού αίματος και ο ιός που παράγεται από αυτά τα κύτταρα είναι παρόμοιος με την αρχική απομόνωση. Από τις μελέτες αυτές συνάγεται το συμπέρασμα ότι ο ιός αυτός καθώς και οι προηγούμενες απομονώσεις του HTLV ανήκουν σε μια γενική οικογένεια Τ-λεμφοτροπικών ρετροϊών που μεταδίδονται οριζόντια στον άνθρωπο και μπορεί να εμπλέκονται σε διάφορα παθολογικά σύνδρομα, συμπεριλαμβανομένου του AIDS.
Το σύνδρομο επίκτητης ανοσολογικής ανεπάρκειας (AIDS) αναγνωρίστηκε πρόσφατα σε διάφορες χώρες (1). Η νόσος έχει αναφερθεί κυρίως σε ομοφυλόφιλους άνδρες με πολλαπλούς συντρόφους και επιδημιολογικές μελέτες υποδηλώνουν οριζόντια μετάδοση μέσω της σεξουαλικής οδού (2), καθώς και μέσω της ενδοφλέβιας χορήγησης φαρμάκων (3) και της μετάγγισης αίματος (4). Η έντονη καταστολή της κυτταρικής ανοσίας που εµφανίζεται σε ασθενείς µε AIDS και οι ποσοτικές τροποποιήσεις των υποπληθυσµών των Τ λεµφοκυττάρων τους (5) υποδηλώνουν ότι τα Τ κύτταρα ή ένα υποσύνολο Τ κυττάρων µπορεί να αποτελούν προτιµητέο στόχο για τον υποτιθέµενο µολυσµατικό παράγοντα. Εναλλακτικά, οι τροποποιήσεις αυτές μπορεί να είναι αποτέλεσμα μεταγενέστερων λοιμώξεων. Η μειωμένη κυτταρική ανοσία μπορεί να οδηγήσει σε σοβαρές ευκαιριακές λοιμώξεις σε ασθενείς με AIDS, πολλοί από τους οποίους αναπτύσσουν σάρκωμα Kaposi (1). Ωστόσο, μια εικόνα επίμονων πολλαπλών λεμφαδενοπαθειών έχει επίσης περιγραφεί σε ομοφυλόφιλους άνδρες (6) και βρέφη (7), τα οποία μπορεί να αναπτύξουν ή όχι AIDS (8). Η ιστολογική όψη αυτών των λεμφαδένων είναι αυτή της αντιδραστικής υπερπλασίας. Τέτοιες περιπτώσεις μπορεί να αντιστοιχούν σε πρώιμη ή ηπιότερη μορφή της νόσου. Αναφέρουμε εδώ την απομόνωση ενός νέου ρετροϊού από λεμφαδένα ομοφυλόφιλου ασθενούς με πολλαπλές λεμφαδενοπάθειες. Ο ιός φαίνεται να είναι μέλος της οικογένειας του ιού της ανθρώπινης Τ-κυτταρικής λευχαιμίας (HTLV) (9).
Ο ρετροϊός πολλαπλασιάστηκε σε καλλιέργειες Τ λεμφοκυττάρων από υγιή ενήλικα δότη και από ομφαλοπλακουντιακό αίμα νεογέννητου ανθρώπου. Οι πρωτεΐνες του πυρήνα του ιού δεν είχαν ανοσολογική συγγένεια με τις πρωτεΐνες p24 και p19 της υποομάδας Ι του HTLV (9). Ωστόσο, ο ορός του ασθενούς αντέδρασε έντονα με επιφανειακό αντιγόνο (ή αντιγόνα) που υπάρχουν στα μολυσμένα με HTLV-I κύτταρα. Επιπλέον, οι ιοντικές απαιτήσεις της αντίστροφης μεταγραφάσης του ιού ήταν κοντά σε εκείνες του HTLV. Πρόσφατα, ένας ρετροϊός τύπου C εντοπίστηκε επίσης σε Τ κύτταρα από ασθενή με λευχαιμία τριχωτών κυττάρων. Η ανάλυση των πρωτεϊνών αυτού του ιού έδειξε ότι σχετίζονταν με τις πρωτεΐνες των προηγούμενων απομονώσεων του HTLV, αλλά διέφεραν σαφώς από αυτές (10). Επιπλέον, πρόσφατες μελέτες των αλληλουχιών νουκλεϊκών οξέων αυτού του νέου ιού δείχνουν ότι είναι λιγότερο από 10 % ομόλογος με τις προηγούμενες απομονώσεις του HTLV (11). Ο ιός αυτός ονομάστηκε HTLV-II για να διακριθεί από όλους τους προηγούμενους, πολύ συγγενείς ιούς που ονομάστηκαν HTLV-I. Ο νέος ρετροϊός που αναφέρεται εδώ φαίνεται να διαφέρει επίσης από τον HTLV-II. Συμπεραίνουμε προσωρινά ότι ο ιός αυτός, καθώς και όλες οι προηγούμενες απομονώσεις του HTLV, ανήκουν σε μια οικογένεια Τ-λεμφοτροπικών ρετροϊών που μεταδίδονται οριζόντια στον άνθρωπο και μπορεί να εμπλέκονται σε διάφορα παθολογικά σύνδρομα, συμπεριλαμβανομένου του AIDS.
Ο ασθενής ήταν ένας 33χρονος ομοφυλόφιλος άνδρας, ο οποίος ζήτησε ιατρική συμβουλή τον Δεκέμβριο του 1982 για αυχενική λεμφαδενοπάθεια και ασθένεια (ασθενής 1). Η εξέταση έδειξε μασχαλιαία και βουβωνική λεμφαδενοπάθεια. Δεν παρατηρήθηκε ούτε πυρετός ούτε πρόσφατη απώλεια βάρους. Ο ασθενής είχε ιστορικό πολλών επεισοδίων γονόρροιας και είχε υποβληθεί σε θεραπεία για σύφιλη τον Σεπτέμβριο του 1982. Κατά τη διάρκεια των συνεντεύξεων ανέφερε ότι είχε περισσότερους από 50 σεξουαλικούς συντρόφους ετησίως και είχε ταξιδέψει σε πολλές χώρες, συμπεριλαμβανομένης της Βόρειας Αφρικής, της Ελλάδας και της Ινδίας. Το τελευταίο του ταξίδι στη Νέα Υόρκη ήταν το 1979.
Οι εργαστηριακές εξετάσεις έδειξαν θετική ορολογική εξέταση (ανοσοσφαιρίνη G) για τον κυτταρομεγαλοϊό (CMV) και τον ιό Epstein-Barr. Ο ιός του απλού έρπητα ανιχνεύθηκε σε κύτταρα από το λαιμό του που καλλιεργήθηκαν σε ανθρώπινα κύτταρα και κύτταρα πιθήκων. Πραγματοποιήθηκε βιοψία ενός τραχηλικού λεμφαδένα. Ένα δείγμα χρησίμευσε για ιστολογική εξέταση, η οποία αποκάλυψε θυλακική υπερπλασία χωρίς αλλαγή της γενικής αρχιτεκτονικής του λεμφαδένα. Οι ανοσοϊστολογικές μελέτες αποκάλυψαν, σε παραφλοιώδεις περιοχές, πολυάριθμα Τ λεμφοκύτταρα (OKT3+). Η τυποποίηση του ολικού κυτταρικού εναιωρήματος έδειξε ότι το 62% των κυττάρων ήταν Τ-λεμφοκύτταρα (OKT3+), το 44% ήταν Τ-βοηθητικά κύτταρα (OKT4+) και το 16% ήταν κατασταλτικά κύτταρα (OKT8+).
Κύτταρα από τον ίδιο βιοψία λεμφαδένα τοποθετήθηκαν σε θρεπτικό μέσο με φυτοαιμοσυγκολλητίνη (PHA), αυξητικό παράγοντα Τ-κυττάρων (TCGF) και αντιορό στην ανθρώπινη α ιντερφερόνη (12). Ο λόγος για τη χρήση αυτού του αντιορού ήταν η εξουδετέρωση της ενδογενούς ιντερφερόνης η οποία εκκρίνεται από κύτταρα που έχουν μολυνθεί χρονίως από ιούς, συμπεριλαμβανομένων των ρετροϊών. Στο σύστημα του ποντικού, είχαμε δείξει προηγουμένως ότι ο αντιορός της ιντερφερόνης μπορούσε να αυξήσει την παραγωγή ρετροϊών κατά 10 έως 50 φορές (13). Μετά από 3 ημέρες, η καλλιέργεια συνεχίστηκε στο ίδιο μέσο χωρίς PHA. Λαμβάνονταν τακτικά δείγματα για τον προσδιορισμό της αντίστροφης μεταγραφάσης και για εξέταση στο ηλεκτρονικό μικροσκόπιο.
Μετά από 15 ημέρες καλλιέργειας, ανιχνεύθηκε δραστηριότητα αντίστροφης μεταγραφάσης στο υπερκείμενο της καλλιέργειας με τη χρήση των ιοντικών συνθηκών που περιγράφηκαν για τον HTLV-I (14). Η παραγωγή του ιού συνεχίστηκε για 15 ημέρες και μειώθηκε στη συνέχεια, παράλληλα με τη μείωση του πολλαπλασιασμού των λεμφοκυττάρων. Τα λεμφοκύτταρα του περιφερικού αίματος που καλλιεργήθηκαν με τον ίδιο τρόπο ήταν σταθερά αρνητικά για δραστηριότητα αντίστροφης μεταγραφάσης, ακόμη και μετά από 6 εβδομάδες. Ο κυτταρομεγαλοϊός μπορούσε να ανιχνευθεί, μετά από παρατεταμένη συγκαλλιέργεια με κύτταρα MRC5, στον αρχικό ιστό βιοψίας, αλλά όχι στα καλλιεργημένα Τ λεμφοκύτταρα σε οποιαδήποτε στιγμή της καλλιέργειας.
Η μετάδοση του ιού επιχειρήθηκε με τη χρήση καλλιέργειας Τ λεμφοκυττάρων που δημιουργήθηκε από ενήλικα υγιή δότη του Κέντρου Μετάγγισης Αίματος του Ινστιτούτου Pasteur. Την 3η ημέρα, η μισή καλλιέργεια συγκαλλιεργήθηκε με λεμφοκύτταρα από τη βιοψία μετά από φυγοκέντρηση των μικτών κυτταρικών εναιωρημάτων. Η δραστικότητα της αντίστροφης μεταγραφάσης μπορούσε να ανιχνευθεί στο υπερκείμενο την ημέρα 15 της συγκαλλιέργειας, αλλά δεν ήταν ανιχνεύσιμη τις ημέρες 5 και 10. Η αντίστροφη μεταγραφάση είχε τα ίδια χαρακτηριστικά με εκείνη που απελευθερώθηκε από τα κύτταρα του ασθενούς και η ποσότητα που απελευθερώθηκε παρέμεινε σταθερή για 15 έως 20 ημέρες. Τα κύτταρα της μη μολυσμένης καλλιέργειας των λεμφοκυττάρων του δότη δεν απελευθέρωσαν δραστηριότητα αντίστροφης μεταγραφάσης κατά τη διάρκεια αυτής της περιόδου ή έως και 6 εβδομάδες όταν διακόπηκε η καλλιέργεια.
Το υπερκείμενο χωρίς κύτταρα της μολυσμένης συγκαλλιέργειας χρησιμοποιήθηκε για τη μόλυνση καλλιεργειών Τ λεμφοκυττάρων ηλικίας 3 ημερών από δύο ομφάλιους λώρους, LCl και LC5, παρουσία Polybrene (2 ,ug/ml). Μετά από περίοδο καθυστέρησης 7 ημερών, ανιχνεύθηκε σχετικά υψηλός τίτλος δραστικότητας αντίστροφης μεταγραφάσης και στις δύο καλλιέργειες λεμφοκυττάρων του ομφάλιου λώρου. Οι πανομοιότυπες καλλιέργειες, οι οποίες δεν είχαν μολυνθεί, παρέμειναν αρνητικές. Αυτές οι δύο διαδοχικές μολύνσεις δείχνουν σαφώς ότι ο ιός μπορεί να πολλαπλασιαστεί σε φυσιολογικά λεμφοκύτταρα είτε από νεογέννητα είτε από ενήλικες.
Το γεγονός ότι αυτή η νέα απομόνωση ήταν ρετροϊός υποδηλώθηκε περαιτέρω από την πυκνότητά του σε διαβάθμιση σακχαρόζης, η οποία ήταν 1,16, και από τη σήμανσή του με [3Η]ουριδίνη (Εικ. 1). Η ηλεκτρονική μικροσκοπία των μολυσμένων λεμφοκυττάρων του ομφάλιου λώρου έδειξε χαρακτηριστικά ανώριμα σωματίδια με πυκνή εκβλάστηση μισοφέγγαρου (τύπου C) στην πλασματική μεμβράνη (Εικ. 2).
Τα μολυσμένα από τον ιό κύτταρα από την αρχική βιοψία καθώς και μολυσμένα λεμφοκύτταρα από το πρώτο και το δεύτερο ιικό πέρασμα χρησιμοποιήθηκαν για να προσδιοριστούν οι βέλτιστες απαιτήσεις για τη δραστικότητα της αντίστροφης μεταγραφάσης και η ειδικότητα του ενζύμου ως προς το πρότυπο. Τα αποτελέσματα ήταν τα ίδια σε όλες τις περιπτώσεις. Η δραστικότητα της αντίστροφης μεταγραφάσης εμφάνισε ισχυρή συγγένεια για το πολυ(αδενυλικό-ολιγοδεοξυθυμιδυλικό) [poly(A)-ολιγο(dT)] και απαιτούσε Mg2+ με βέλτιστη συγκέντρωση (5 mM) ελαφρώς χαμηλότερη από εκείνη της HT (14) και βέλτιστο pH 7,8. Η αντίδραση δεν αναστέλλεται από την ακτινομυκίνη D. Αυτός ο χαρακτήρας, καθώς και η προτιμησιακή ειδικότητα για ριβοζοαδενυλικό *δεοξυθυμιδυλικό έναντι δεοξυαδενυλικού *δεοξυθυμιδυλικού, διακρίνουν το ιικό ένζυμο από τις εξαρτώμενες από το DNA πολυμεράσες.
Στη συνέχεια προσδιορίσαμε κατά πόσον αυτή η απομόνωση ήταν ή όχι δυσδιάκριτη από τις απομονώσεις του HTLV-1. Ο ιός της ανθρώπινης Τ-κυτταρικής λευχαιμίας έχει απομονωθεί από καλλιεργημένα Τ-λεμφοκύτταρα ασθενών με Τ-λεμφώματα και Τ-λευχαιμίες [για μια ανασκόπηση, βλέπε (9)]. Τα αντισώματα που χρησιμοποιήθηκαν ήταν ειδικά για τις πρωτεΐνες p19 και p24 του πυρήνα του HTLV-I. Ένα μονοκλωνικό αντίσωμα έναντι της p19 (15) και ένα πολυκλωνικό αντίσωμα κατσίκας έναντι της p24 (16) χρησιμοποιήθηκαν σε μια έμμεση δοκιμασία φθορισμού έναντι μολυσμένων κυττάρων από τη βιοψία του ασθενούς 1 και λεμφοκυττάρων που ελήφθησαν από υγιή δότη και μολύνθηκαν με τον ίδιο ιό. Όπως φαίνεται στον Πίνακα 1, τα κύτταρα που παρήγαγαν τον ιό δεν αντέδρασαν με κανέναν από τους δύο τύπους αντισωμάτων, ενώ δύο σειρές λεμφοκυττάρων του ομφάλιου λώρου που είχαν μολυνθεί χρονίως με HTLV (17) και χρησιμοποιήθηκαν ως μάρτυρες παρουσίασαν έντονο επιφανειακό φθορισμό.
Όταν ο ορός από τον ασθενή 1 ελέγχθηκε έναντι μολυσμένων λεμφοκυττάρων από τη βιοψία, ο επιφανειακός φθορισμός ήταν τόσο έντονος όσο και εκείνος των γραμμών ελέγχου που παράγουν HTLV. Αυτό υποδηλώνει ότι ο ορός του ασθενούς περιέχει αντισώματα που αναγνωρίζουν ένα κοινό αντιγόνο που υπάρχει στα κύτταρα που παράγουν HTLV-I και στα λεμφοκύτταρα του ασθενούς. Ομοίως, τα λεμφοκύτταρα του ομφάλιου λώρου που μολύνθηκαν με τον ιό από τον ασθενή 1 δεν αντέδρασαν με αντισώματα έναντι του p19 ή του p24. Μόνο ένα μικρό ποσοστό των κυττάρων (περίπου I τοις εκατό) αντέδρασε με τον ορό του ασθενούς. Αυτό μπορεί να υποδηλώνει ότι μόνο αυτό το κλάσμα των κυττάρων είχε μολυνθεί και παρήγαγε ιό. Εναλλακτικά, το αντιγόνο που αναγνωρίζεται από τον ορό του ασθενούς μπορεί να περιέχει κυτταρικούς καθοριστικούς παράγοντες που παρουσιάζουν μικρότερη έκφραση στα Τ λεμφοκύτταρα των νεογνών.
Καλλιεργήσαμε επίσης Τ λεμφοκύτταρα από λεμφαδένα ενός άλλου ασθενούς (ασθενής 2), ο οποίος παρουσίαζε πολλαπλές αδενοπάθειες και είχε έρθει σε στενή επαφή με ένα περιστατικό AIDS. Αυτά τα λεμφοκύτταρα δεν παρήγαγαν ιογενή αντίστροφη μεταγραφάση- ωστόσο, αντέδρασαν στη δοκιμασία ανοσοφθορισμού με ορό από τον ασθενή 1. Επιπλέον, ο ορός από τον ασθενή 2 αντέδρασε έντονα με γραμμές ελέγχου που παρήγαγαν HTLV (δεν φαίνεται). Προκειμένου να προσδιοριστεί ποιο ιικό αντιγόνο αναγνωρίζεται από τα αντισώματα που υπάρχουν στους ορούς των δύο ασθενών, πραγματοποιήθηκαν διάφορα πειράματα ανοσοκατακρήμνισης. Τα λεμφοκύτταρα του ομφάλιου λώρου που μολύνθηκαν με ιό από τον ασθενή Ι και μη μολυσμένους μάρτυρες επισημάνθηκαν με [35S]μεθειονίνη για 20 ώρες. Τα κύτταρα λύθηκαν με απορρυπαντικά και παρασκευάστηκε κυτταροπλασματικό εκχύλισμα S10. Ο επισημασμένος ιός που απελευθερώθηκε στο υπερκείμενο απελευθερώθηκε σε διαβάθμιση σακχαρόζης. Και τα δύο υλικά ανοσοκατακρημνίστηκαν με αντιορό στον HTLV- I p24, με ορό από ασθενείς 1 και 2 και με δείγματα ορού από υγιείς δότες. Τα ανοσοσυμπλέγματα αναλύθηκαν με ηλεκτροφόρηση σε πηκτή πολυακρυλαμιδίου υπό συνθήκες μετουσίωσης. Η Εικόνα 3 δείχνει ότι μια πρωτεΐνη p25 που υπάρχει στα μολυσμένα από τον ιό κύτταρα από τον ασθενή 1 και στα κύτταρα LC1 που έχουν μολυνθεί με τον ιό αυτό, αναγνωρίστηκε ειδικά από τον ορό από τους ασθενείς Ι και 2, αλλά όχι από τον αντιορό για τον HTLV-1 p24 ή τον ορό των φυσιολογικών δοτών. Αντίθετα, το p24 που υπήρχε σε εκχυλίσματα κυττάρων ελέγχου μολυσμένων με HTLV αναγνωρίστηκε από αντισώματα κατά του HTLV αλλά όχι από τον ορό του ασθενούς 1. Μια ασθενής ζώνη (λωρίδα 2, Εικ. 3Β) δεν μπορούσε να παρατηρηθεί σχεδόν καθόλου με τον ορό από τον ασθενή 2, γεγονός που υποδηλώνει κάποιες ομοιότητες της πρωτεΐνης p25 από τα κύτταρα αυτού του ασθενούς με την HTLV-1 p24. Όταν ο καθαρισμένος, επισημασμένος ιός από τον ασθενή Ι αναλύθηκε υπό παρόμοιες συνθήκες, μπορούσαν να παρατηρηθούν τρεις κύριες πρωτεΐνες: η πρωτεΐνη p25 και πρωτεΐνες με μοριακά βάρη 80.000 και 45.000. Η πρωτεΐνη 45Κ μπορεί να οφείλεται σε επιμόλυνση του ιού από κυτταρική ακτίνη, η οποία ήταν παρούσα στα ανοσοκατακρημνίσματα όλων των κυτταρικών εκχυλισμάτων (Εικ. 3).
Τα αποτελέσματα αυτά, σε συνδυασμό με τα δεδομένα ανοσοφθορισμού, υποδεικνύουν ότι ο ρετροϊός από τον ασθενή 1 περιέχει μια σημαντική πρωτεΐνη p25, παρόμοια σε μέγεθος με εκείνη του HTLV-I αλλά διαφορετική ανοσολογικά. Οι αλληλουχίες του DNA αυτών και άλλων μελών της οικογένειας HTLV συγκρίνονται. Όλες οι προσπάθειες μόλυνσης άλλων κυττάρων, όπως μια Β-λεμφοβλαστοειδής κυτταρική σειρά (Raji), ανώριμες ή προ-Τ κυτταρικές σειρές (CEM, HSB2) και φυσιολογικοί ινοβλάστες (κυτταρικές σειρές πνευμόνων αιλουροειδών και μινκ) ήταν ανεπιτυχείς.
Ο ρόλος αυτού του ιού στην αιτιολογία του AIDS δεν έχει ακόμη προσδιοριστεί. Ο ασθενής 1 είχε κυκλοφορούντα αντισώματα έναντι του ιού και ορισμένα από τα τελευταία παρέμειναν στα λεμφοκύτταρα του λεμφαδένα (ή των λεμφαδένων) του. Τα λεμφοκύτταρα που παρήγαγαν τον ιό δεν φάνηκε να έχουν αυξημένο δυναμικό ανάπτυξης in vitro σε σύγκριση με τα μη μολυσμένα κύτταρα. Επομένως, οι πολλαπλές λεμφαδενοπάθειες μπορεί να αντιπροσωπεύουν αντίδραση του ξενιστή έναντι της επίμονης ιογενούς λοίμωξης και όχι υπερπολλαπλασιασμό των μολυσμένων από τον ιό λεμφοκυττάρων. Άλλοι παράγοντες, όπως η επαναλαμβανόμενη λοίμωξη από τον ίδιο ιό ή άλλους βακτηριακούς και ιογενείς παράγοντες, μπορεί, σε ορισμένους ασθενείς, να υπερφορτώσουν αυτόν τον πρώιμο αμυντικό μηχανισμό και να επιφέρουν μη αναστρέψιμη εξάντληση των Τ κυττάρων που συμμετέχουν στην κυτταρική ανοσία.
doi: 10.1126/science.6189183.
Αυτός είναι ένας εντυπωσιακός κύκλος. Ο Montagnier φαίνεται αρκετά ικανοποιημένος με το δημιούργημά του.
Συνοψίζοντας:
Σύμφωνα με τον ανακαλυφτή του HIV Luc Montagnier, όντως "απομόνωσαν" τον HIV επειδή "πέρασαν" τον "ιό" και έκαναν καλλιέργεια του "ιού"
Δήλωσε ότι ο Robert Gallo (Αμερικανός ιολόγος που λογοπάτησε το έργο του Montagnier) είπε: "Δεν απομόνωσαν τον ιό... και εμείς (Gallo et al.), τον κάναμε να εμφανιστεί σε αφθονία σε μια αθάνατη κυτταρική σειρά".
Αλλά πριν τον κάνει να εμφανιστεί σε αθάνατες κυτταρικές σειρές, ο Montagnier ισχυρίστηκε ότι η ομάδα του τον έκανε να εμφανιστεί σε καλλιέργειες φυσιολογικών ιμφοκυττάρων από έναν αιμοδότη
Ο Montagnier δήλωσε ότι είναι προφανές ότι δεν θα μπορούσε κανείς να απομονώσει κανέναν ρετροϊό χωρίς να γνωρίζει άλλους "ρετροϊούς".
Το να περάσει ένας "ιός" σειριακά είναι δύσκολο, διότι όταν βάζετε το υλικό σε καθαρισμό, σε μια κλίση, οι "ρετροϊοί" είναι πολύ εύθραυστοι, οπότε σπάνε ο ένας τον άλλον και χάνουν σε μεγάλο βαθμό τη μολυσματικότητά τους.
Στην αρχή έπεσαν πάνω σε έναν "ιό" που δεν σκότωνε τα κύτταρα.
Ήταν ο πρώτος "ιός" BRU, ωστόσο είχαν πολύ λίγο από αυτόν και δεν μπορούσαν να τον μεταδώσουν σε μια αθάνατη κυτταρική σειρά
Αργότερα πέτυχαν με το δεύτερο στέλεχος ωστόσο ο Montagnier δήλωσε ότι υπάρχει το αρκετά μυστηριώδες πρόβλημα της μόλυνσης αυτού του δεύτερου στελέχους από το πρώτο που ήταν LAI
Σύντομη παρατήρηση: τα BRU και LAI θεωρούνται τα πρώτα στελέχη του HIV.
"Η αρχική απομόνωση του HIV-1 Bru, που παλαιότερα ονομαζόταν LAV, προήλθε από τον ασθενή BRU. Ο HIV-1 Lai προήλθε από τον ασθενή LAI και μόλυνε μια καλλιέργεια HIV-1 Bru μεταξύ 20 Ιουλίου και 3 Αυγούστου 1983. Η καλλιέργεια έγινε, στην πραγματικότητα, ο HIV-1 Lai, που αναγνωρίζεται από ένα μοναδικό μοτίβο στο βρόχο V3. Εξαιτίας αυτής της μόλυνσης στάλθηκαν δύο, αντί για μία, απομονώσεις του HIV-1 στο Εργαστήριο Βιολογίας Καρκινικών Κυττάρων του Εθνικού Ινστιτούτου Καρκίνου στις 23 Σεπτεμβρίου 1983".
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2035026/
Όταν ρωτήθηκε σχετικά με την έλλειψη καθαρισμού για την ΗΜ απεικόνιση του HIV, ο Montagnier δήλωσε ότι υπήρχε τόσο μικρή παραγωγή "ιού" που ήταν αδύνατο να δει κανείς τι θα μπορούσε να υπάρχει σε ένα συμπύκνωμα "ιού" στην κλίση
Αυτό που είδαν ήταν κάποια σωματίδια αλλά δεν είχαν τη μορφολογία που είναι χαρακτηριστική των "ρετροϊών", καθώς ήταν πολύ διαφορετικά
Ισχυρίστηκε ότι ήταν "μια ρωμαϊκή προσπάθεια" με την καλλιέργεια καθώς χρειάστηκαν πολλές ώρες για να βρεθούν οι πρώτες εικόνες
Από τη μορφολογία και μόνο δεν θα μπορούσε κανείς να πει ότι οι εικόνες ΕΜ (ηλεκτρονικού μικροσκοπίου) ήταν πραγματικά "ρετροϊός"
Ένας Γάλλος ειδικός στα ΗΜ των "ρετροϊών" επιτέθηκε δημοσίως στον Montagnier λέγοντας: "Αυτός δεν είναι ρετροϊός, είναι ένας αρενοϊός", καθώς υπάρχουν και άλλες οικογένειες "ιών" που εκκολάπτονται και έχουν ακίδες στην επιφάνεια κ.λπ.
Δήλωσε ότι δεν ήταν μόνο η μορφολογία και η εκβλάστηση, αλλά ότι υπήρχε αντίστροφη μεταγραφάση
Δεν ήταν μία ιδιότητα αλλά το σύνολο των ιδιοτήτων που τους έκανε να πουν ότι πρόκειται για "ρετροϊό" της οικογένειας των "λεντιβιρών"
Μεμονωμένα, κάθε μία από τις ιδιότητες δεν είναι πραγματικά ειδική.
Οι τέσσερις ιδιότητες ήταν:
Η πυκνότητα
Αντίστροφη μεταγραφάση
Εικόνες της εκβλάστησης
Η αναλογία με τον "ιό" της visna
Ο Montagnier δήλωσε ότι έχουμε ενδογενείς (ανθρώπινης προέλευσης) "ρετροϊούς" που μερικές φορές εκφράζουν σωματίδια - αλλά ενδογενούς προέλευσης, και οι οποίοι επομένως δεν έχουν παθολογικό ρόλο
Το πρώτο ερώτημα που τους έθεσε η Nature ήταν: "Τι είναι αυτό το πράγμα;": "Δεν πρόκειται για εργαστηριακή μόλυνση; Μήπως είναι μήπως ένας "ρετροϊός" ποντικού ή ένας "ρετροϊός" ζώου;"
Ο Montagnier δήλωσε ότι είναι σημαντικό να το πάρουμε ως σύνολο, καθώς αν πάρουμε κάθε ιδιότητα ξεχωριστά, δεν είναι ειδική και είναι το σύνολο που δίνει την ειδικότητα
Κατά την καλλιέργεια του "ιού", χρησιμοποίησαν πολλές κυτταρικές σειρές και η μόνη που μπορούσε να τον παράγει ήταν τα λυμφοκύτταρα Tampon (!;)
Παραδέχτηκε ότι όταν βλέπει κανείς εικόνες ΕΜ, δεν μπορεί να διακρίνει αν το σωματίδιο είναι "ρετροϊός" ή όχι
Χρησιμοποίησαν έναν άτλαντα προηγούμενων "ρετροϊών" για να διαπιστώσουν αν ο "ιός" είχε τη μορφολογία ενός από αυτούς, καθώς χρειάζεται μια κάποια εξοικείωση για να τους διακρίνεις
Ο Montagnier επανέλαβε ότι δεν καθάρισαν τον "ιό" διότι αν τον καθαρίσεις, καταστρέφεις τα σωματίδια του "ιού"
Δήλωσε ότι για τα μολυσματικά σωματίδια, είναι καλύτερο να μην τα αγγίζουμε πολύ
Η ανάλυση των πρωτεϊνών του "ιού" απαιτεί μαζική παραγωγή και καθαρισμό και γι' αυτό είναι απαραίτητο να γίνει αυτό
Από την άποψη αυτή, ο Montagnier υποστήριξε ότι απέτυχαν εν μέρει.
Δεν παρήγαγαν αρκετά σωματίδια για να καθαρίσουν και να χαρακτηρίσουν τις πρωτεΐνες του "ιού", καθώς αυτό δεν μπορούσε να γίνει
Δεν μπόρεσαν να παράγουν πολλούς "ιούς" εκείνη τη στιγμή επειδή ο "ιός" δεν εμφανίστηκε στην αθάνατη κυτταρική σειρά
Ο Montagnier δήλωσε ότι πίστευε ότι ο Gallo επίσης δεν έκανε καθαρισμό και πίστευε ότι ο Gallo είχε ξεκινήσει πολύ γρήγορα το κομμάτι της μοριακής κλωνοποίησης
Είπε επίσης ότι δεν μπορείς να καθαρίσεις τον "ιό" αλλά αν γνωρίζεις κάποιον που έχει αντισώματα έναντι των πρωτεϊνών του "ιού", μπορείς να καθαρίσεις το σύμπλεγμα αντισώματος/αντιγόνου
Ωστόσο, αυτό αποτελεί πλήρη αντίφαση, καθώς ισχυρίστηκε ότι ο καθαρισμός πρέπει να γίνει για να χαρακτηριστούν οι πρωτεΐνες του "ιού", οπότε αν δεν μπορείτε να καθαρίσετε τον "ιό" για να χαρακτηρίσετε τις πρωτεΐνες, δεν θα είστε σε θέση να γνωρίζετε ποιες πρωτεΐνες δρουν κατά του "ιού", καθώς και τυχόν ειδικά αντισώματα που αντιδρούν σε αυτές
Ο Montagnier ισχυρίστηκε ότι τα αντισώματα είναι πολύ ειδικά και ότι ξέρουν να διακρίνουν ένα μόριο σε ένα εκατομμύριο.
Με τα μονοκλωνικά αντισώματα ψαρεύετε πραγματικά ΜΙΑ πρωτεΐνη και όλη αυτή χρησιμοποιείται για την ανίχνευση διαγνωστικών αντιγόνων
Υπάρχουν κυτταρικές πρωτεΐνες που συναντά κανείς παντού - υπάρχει ένας μη ειδικός "θόρυβος υποβάθρου"
Η αντίδραση αντισωμάτων με το p24 θεωρείται μη ειδική και δεν επαρκεί για τη διάγνωση της λοίμωξης από τον HIV
Ο Montagnier συμφώνησε ότι καμμία πρωτεΐνη δεν είναι επαρκής για τη διάγνωση του HIV
Όταν ρωτήθηκε γιατί, στη ζώνη διαβάθμισης πυκνότητας 1,16, το 80% των σωματιδίων είναι "μη-ιικά" και μόνο το 20% είναι HIV, ο Montagnier εξήγησε ότι σε αυτή την πυκνότητα, υπάρχουν μικροκυψελίδες κυτταρικής προέλευσης, οι οποίες έχουν περίπου το ίδιο μέγεθος με τον "ιό", και στη συνέχεια ο ίδιος ο "ιός", κατά την εκβλάστηση, φέρνει κυτταρικές πρωτεΐνες
Ουσιαστικά αυτές οι πρωτεΐνες δεν είναι ""ιϊκές" και είναι κυτταρικής προέλευσης
Δήλωσε ότι με αυτή την τεχνική δεν μπορεί κανείς να τις διαφοροποιήσει με ακρίβεια
Εάν καθαρίσετε τον "ιό" στο μέγιστο βαθμό με διαδοχικές κλίσεις, σκοντάφτετε πάντα στις ίδιες πρωτεΐνες
Ο Montagnier δήλωσε ότι οι άλλες πρωτεΐνες μειώνονται μόνο λίγο καθώς μπορείς να αφαιρέσεις τα μικροκυψελίδια, αλλά κάθε φορά χάνεις πολύ "ιό", οπότε είναι απαραίτητο να έχεις πολύ "ιό" στην αρχή για να κρατήσεις λίγο όταν φτάσεις στο τέλος
Και πάλι, η μοριακή ανάλυση, η αλληλουχία αυτών των πρωτεϊνών είναι αυτή που θα επιτρέψει να πει κανείς αν είναι "ιϊκής" προέλευσης ή όχι.
Ωστόσο, αυτό που δεν φαίνεται να κατανοεί ο Montagnier είναι ότι αν δεν μπορείς να καθαρίσεις τον "ιό" προκειμένου να προσδιορίσεις ποιες πρωτεΐνες ανήκουν στον "ιό", η αλληλουχία των πρωτεϊνών δεν θα σου πει αν είναι " ιϊκής" προέλευσης ή όχι
Αυτός ο "ιός" είναι ένας τυπικός "ιός" όγκου RNA τύπου C, εκφύεται από την κυτταρική μεμβράνη, προτιμά το μαγνήσιο για τη δραστηριότητα της αντίστροφης μεταγραφάσης και έχει ένα εσωτερικό αντιγόνο (p25) παρόμοιο με το HTLVp24.
Τα αντισώματα από τον ορό του εν λόγω ασθενούς αντιδρούν με πρωτεΐνες από "ιούς" της υποομάδας HTLV-I, αλλά οι ειδικοί για τον τύπο αντιοροί για τον HTLV-I δεν κατακρημνίζουν τις πρωτεΐνες του νέου απομονωμένου ιού
Θυμηθείτε, ο Montagnier παραδέχθηκε ότι δεν καθάρισαν τον "ιό" και ότι ο καθαρισμός ήταν απαραίτητος προκειμένου να χαρακτηριστούν οι πρωτεΐνες του "ιού", οπότε πώς θα μπορούσαν να γνωρίζουν αν τα αντισώματα αντιδρούν σε πρωτεΐνες του "ιού";
Ο "ιός" από αυτόν τον ασθενή έχει μεταδοθεί στα λεμφοκύτταρα του ομφαλοπλακουντιακού αίματος και ο "ιός" που παράγεται από αυτά τα κύτταρα είναι παρόμοιος με την αρχική απομόνωση
Από τις μελέτες αυτές συνάγεται το συμπέρασμα ότι αυτός ο "ιός" καθώς και οι προηγούμενες απομονώσεις του HTLV ανήκουν σε μια γενική οικογένεια Τ-λεμφοτροπικών "ρετροϊών" που μεταδίδονται οριζόντια στον άνθρωπο και μπορεί να εμπλέκονται σε διάφορα παθολογικά σύνδρομα, συμπεριλαμβανομένου του AIDS
Η έντονη καταστολή της κυτταρικής ανοσίας που εµφανίζεται σε ασθενείς µε AIDS και οι ποσοτικές τροποποιήσεις των υποπληθυσµών των Τ λεµφοκυττάρων τους υποδηλώνουν ότι τα Τ κύτταρα ή ένα υποσύνολο Τ κυττάρων µπορεί να είναι προτιµώµενος στόχος για τον υποτιθέµενο µολυσµατικό παράγοντα.
Εναλλακτικά, οι τροποποιήσεις αυτές μπορεί να προκύψουν από μεταγενέστερες λοιμώξεις
Η μειωμένη κυτταρική ανοσία μπορεί να οδηγήσει σε σοβαρές ευκαιριακές λοιμώξεις στους ασθενείς με AIDS, πολλοί από τους οποίους αναπτύσσουν σάρκωμα Kaposi
Ωστόσο, μια εικόνα επίμονων πολλαπλών λεμφαδενοπαθειών έχει επίσης περιγραφεί σε ομοφυλόφιλους άνδρες και βρέφη που μπορεί να αναπτύξουν ή να μην αναπτύξουν AIDS
Ο "ρετροϊός" πολλαπλασιάστηκε σε καλλιέργειες Τ λεμφοκυττάρων από υγιή ενήλικα δότη και από ομφαλοπλακουντιακό αίμα νεογέννητων ανθρώπων
Κατέληξαν στο προσωρινό συμπέρασμα (δηλ. υπόκειται σε περαιτέρω επιβεβαίωση- όχι οριστικά) ότι αυτός ο "ιός", καθώς και όλες οι προηγούμενες απομονώσεις του HTLV, ανήκουν σε μια οικογένεια Τ-λεμφοτροπικών "ρετροϊών" που μεταδίδονται οριζόντια στον άνθρωπο και μπορεί να εμπλέκονται σε διάφορα παθολογικά σύνδρομα, συμπεριλαμβανομένου του AIDS
Ο ασθενής από τον οποίο προήλθε ο "ιός" είχε ιστορικό πολλών επεισοδίων βλεννόρροιας και είχε υποβληθεί σε θεραπεία για σύφιλη τον Σεπτέμβριο του 1982
Παραδόξως, η σύφιλη έχει ακριβώς τα ίδια συμπτώματα με το AIDS και η συνήθης θεραπεία είναι μια σειρά ενέσεων Penicllin, οι οποίες συμπτωματικά (ή όχι) μπορούν να καταστρέψουν το "ανοσοποιητικό" σύστημα ενός ατόμου
Οι εργαστηριακές εξετάσεις έδειξαν θετική ορολογική εξέταση (ανοσοσφαιρίνη G) για τον "κυτταρομεγαλοϊό" (CMV) και τον "ιό" Epstein-Barr.
Ο "ιός του απλού έρπητα" ανιχνεύθηκε σε κύτταρα από το λαιμό του που καλλιεργήθηκαν σε ανθρώπινα κύτταρα και κύτταρα πιθήκων
Κύτταρα από τον ίδιο βιοψία λεμφαδένα τοποθετήθηκαν σε μέσο καλλιέργειας με φυτοαιμοσυγκολλητίνη (PHA), αυξητικό παράγοντα Τ-κυττάρων (TCGF) και αντιορό στην ανθρώπινη α ιντερφερόνη
Ο λόγος για τη χρήση αυτού του αντιορού ήταν η εξουδετέρωση της ενδογενούς ιντερφερόνης η οποία εκκρίνεται από κύτταρα χρόνια μολυσμένα από "ιούς", συμπεριλαμβανομένων των "ρετροϊών"
Μετά από 15 ημέρες καλλιέργειας, ανιχνεύθηκε δραστηριότητα αντίστροφης μεταγραφάσης στο υπερκείμενο της καλλιέργειας με τη χρήση των ιοντικών συνθηκών που περιγράφονται για τον HTLV-I και η παραγωγή "ιού" συνεχίστηκε για 15 ημέρες και μειώθηκε στη συνέχεια, παράλληλα με τη μείωση του πολλαπλασιασμού των λεμφοκυττάρων
Γρήγορη παρένθεση: ο Montagnier δήλωσε εδώ ότι ο "ιός" καλλιεργήθηκε για 30 ημέρες, καθώς χρειάστηκαν 15 ημέρες για να ανιχνευθεί η δραστηριότητα της αντίστροφης μεταγραφάσης και άλλες 15 ημέρες για να μειωθεί η παραγωγή του "ιού". Είναι ενδιαφέρον ότι σε μια εργασία που έγραψε το 2003, ο Montagnier δήλωσε το εξής:
"Η αρχική κλινική απομόνωση, σε αντίθεση με τον HTLV, δεν είχε μετασχηματιστικές ή κυτταροπαθητικές επιδράσεις στα Τ λεμφοκύτταρα. Η Barré-Sinoussi σημειώνει στο σχόλιό της ότι η καλλιέργεια λεμφοκυττάρων που ξεκίνησα από τη βιοψία λεμφαδένων του ασθενούς πέθανε μετά από 4 εβδομάδες. Αλλά αυτό ήταν αναμενόμενο μόλις συνειδητοποιήσαμε ότι τα κύτταρα δεν είχαν μετασχηματιστεί, διότι και οι φυσιολογικές καλλιέργειες του ίδιου τύπου πεθαίνουν μέσα σε αυτό το χρονικό διάστημα. Επομένως, η ανάγκη επιτυχούς χρήσης μονοπύρηνων κυττάρων περιφερικού αίματος για τη διατήρηση μιας ιικής καλλιέργειας ήταν μια πιθανή υπόθεση που αποδείχθηκε σωστή. Ο ιός θα ταξινομηθεί αργότερα ως μη-συγκυτιογόνος, όπως συμβαίνει συνήθως για τους ιούς που απομονώνονται από πρόσφατα μολυσμένους ασθενείς με HIV, οι οποίοι είναι είτε ασυμπτωματικοί είτε παρουσιάζουν λεμφαδενοπάθειες. Ωστόσο, το πρώτο τυπικό κυτταροπαθητικό αποτέλεσμα, ο σχηματισμός μεγάλων συγκυττάρων, δεν παρατηρήθηκε παρά μόνο 5 μήνες αργότερα, σε ένα τρίτο κλινικό δείγμα (HIV LAI) από έναν ασθενή που είχε πλήρως ανεπτυγμένο AIDS".
https://www.nature.com/articles/nm1003-1235a
Φαίνεται ότι καλλιέργησαν τον "ιό" για 30 ημέρες γνωρίζοντας πολύ καλά ότι οι κανονικές καλλιέργειες του ίδιου τύπου πεθαίνουν μέσα σε αυτό το χρονικό διάστημα των 4 εβδομάδων. Ο Montagnier δήλωσε ότι δεν παρατήρησαν καν το κυτταροπαθητικό αποτέλεσμα (CPE) μέχρι που είχαν ένα τρίτο κλινικό δείγμα 5 μήνες αργότερα. Το CPE υποστηρίζεται ότι είναι δομικές αλλαγές στα κύτταρα του ξενιστή που προκαλούνται από την "ιϊκή" εισβολή και όμως, αυτό απουσίαζε στα δύο πρώτα δείγματά τους.
Την 3η ημέρα, το ήμισυ της καλλιέργειας συγκαλλιεργήθηκε με λεμφοκύτταρα από τη βιοψία μετά από φυγοκέντρηση των μικτών κυτταρικών εναιωρημάτων.
Τα κύτταρα της μη μολυσμένης καλλιέργειας των λεμφοκυττάρων του δότη δεν απελευθέρωσαν δραστικότητα αντίστροφης μεταγραφάσης κατά τη διάρκεια αυτής της περιόδου ή έως και 6 εβδομάδες όταν η καλλιέργεια διακόπηκε
Το υπερκείμενο χωρίς κύτταρα της μολυσμένης συγκαλλιέργειας χρησιμοποιήθηκε για τη μόλυνση καλλιεργειών Τ λεμφοκυττάρων ηλικίας 3 ημερών από δύο ομφάλιους λώρους, LCl και LC5, παρουσία Polybrene (2 ,ug/ml)
Πληροφοριακά, το Polybrene έχει αποδειχθεί ότι επηρεάζει αρνητικά τον πολλαπλασιασμό και τη διατήρηση του δυναμικού ανάπτυξης των ανθρώπινων κερατινοκυττάρωνεδώ
Η ηλεκτρονική μικροσκοπία των μολυσμένων λεμφοκυττάρων του ομφάλιου λώρου έδειξε χαρακτηριστικά ανώριμα σωματίδια με πυκνή εκβλάστηση μισοφέγγαρου (τύπου C) στην πλασματική μεμβράνη
Τα "μολυσμένα από τον ιό" κύτταρα από την αρχική βιοψία καθώς και τα μολυσμένα λεμφοκύτταρα από το πρώτο και το δεύτερο "ιϊκό" πέρασμα χρησιμοποιήθηκαν για να προσδιοριστούν οι βέλτιστες απαιτήσεις για τη δραστικότητα της αντίστροφης μεταγραφάσης και η ειδικότητα του ενζύμου ως προς το πρότυπο
Ένα μονοκλωνικό αντίσωμα έναντι του p19 (15) και ένα πολυκλωνικό αντίσωμα κατσίκας έναντι του p24 (16) χρησιμοποιήθηκαν σε μια έμμεση (δηλ. όχι άμεσα προκαλούμενη ή προκύπτουσα από κάτι) δοκιμασία φθορισμού έναντι μολυσμένων κυττάρων από τη βιοψία του ασθενούς 1 και λεμφοκυττάρων που ελήφθησαν από υγιή δότη και μολύνθηκαν με τον ίδιο "ιό" (γιατί δεν χρησιμοποίησαν λεμφοκύτταρα υγιούς δότη χωρίς τον προστιθέμενο "ιό";)
Τα λεμφοκύτταρα του ομφάλιου λώρου που μολύνθηκαν με τον "ιό" από τον ασθενή 1 δεν αντέδρασαν με αντισώματα έναντι του p19 ή του p24
Μόνο ένα μικρό ποσοστό των κυττάρων (περίπου I τοις εκατό) αντέδρασε με τον ορό του ασθενούς
Αυτό μπορεί να υποδηλώνει ότι μόνο αυτό το κλάσμα των κυττάρων μολύνθηκε και παρήγαγε "ιό"
Όταν ο καθαρισμένος, επισημασμένος "ιός" από τον ασθενή Ι αναλύθηκε υπό παρόμοιες συνθήκες, τρεις κύριες πρωτεΐνες μπορούσαν να παρατηρηθούν: η πρωτεΐνη p25 και πρωτεΐνες με μοριακά βάρη 80.000 και 45.000
Η πρωτεΐνη 45Κ μπορεί να οφείλεται σε επιμόλυνση του "ιού" από κυτταρική ακτίνη η οποία ήταν παρούσα στα ανοσοκατακρημνίσματα όλων των κυτταρικών εκχυλισμάτων (δηλαδή "καθαρισμένος" με επιμολύνσεις... ή αλλιώς γνωστός ως μη καθαρισμένος)
Όλες οι προσπάθειες μόλυνσης άλλων κυττάρων, όπως μια Β-λεμφοβλαστοειδής κυτταρική σειρά (Raji), ανώριμες ή προ-Τ κυτταρικές σειρές (CEM, HSB2) και φυσιολογικοί ινοβλάστες (κυτταρικές σειρές πνευμόνων αιλουροειδών και βιζόν) ήταν ανεπιτυχείς.
Ο ρόλος αυτού του "ιού" στην αιτιολογία του AIDS δεν έχει ακόμη προσδιοριστεί (τελικά, ο Montagnier πίστευε ότι ο "ιός" του δεν προκαλούσε AIDS).
Άλλοι παράγοντες, όπως η επαναλαμβανόμενη μόλυνση από τον ίδιο "ιό" ή άλλους βακτηριακούς και "ιογενείς" παράγοντες μπορεί, σε ορισμένους ασθενείς, να υπερφορτώσουν αυτόν τον πρώιμο αμυντικό μηχανισμό και να επιφέρουν μια μη αναστρέψιμη εξάντληση των Τ κυττάρων που συμμετέχουν στην κυτταρική ανοσία
Ο Luc Montagnier εξαπέλυσε το "ρετροϊικό" τέρας του στον κόσμο το 1983 και αυτό εξελίχθηκε σε ένα τέρας του είδους του κατά τη διάρκεια των δεκαετιών που ακολούθησαν. Αμέτρητες ζωές έχουν καταστραφεί από τον φόβο της διάγνωσης του HIV καθώς και από την επακόλουθη υπαγωγή σε τοξικά φαρμακευτικά σκευάσματα μαύρης ετικέτας. Το στίγμα του θετικού αποτελέσματος της εξέτασης είναι το "ιογενές" σημαδεμένο γράμμα που άδικα τοποθετείται σε ένα άτομο που βρίσκεται σε τοξική κατάσταση λόγω επιλογών στον τρόπο ζωής ή/και περιβαλλοντικών παραγόντων. Δεν έχει σημασία ότι ο Μοντανιέ προσπάθησε να κατευθύνει το τέρας του από τον θανατηφόρο δολοφόνο που το εμφάνισαν ως έναν ακίνδυνο επιβάτη μέσα στο ανθρώπινο σώμα.
Δεν έχει σημασία ότι πίστευε ότι ο HIV δεν προκαλούσε το AIDS. Δεν έχει σημασία ότι πίστευε ότι θα έπρεπε να εξεταστούν και άλλοι συμπαράγοντες εκτός από έναν "ιό" όσον αφορά το AIDS. Δεν έχει σημασία ότι πίστευε ότι ο HIV θα μπορούσε να εξαλειφθεί με βάση τις υγιεινές επιλογές διατροφής/βιοτικού τρόπου ζωής. Δεν έχει σημασία ότι παραδέχτηκε ότι δεν καθάρισε κανέναν "ιό". Η κληρονομιά του Μοντανιέ είναι συνδεδεμένη με το θηρίο της δικής του δημιουργίας. Άνοιξε το κουτί της Πανδώρας και απελευθέρωσε αυτή την απατηλή κατάρα στον κόσμο. Γι' αυτό, αμφιβάλλω αν θα αναπαυθεί εν ειρήνη.
Share this post